目前有太多的公司开始布局流式荧光免疫试剂的开发，不管是初创公司出于融资也好，还是老牌企业谋求新的出路也罢，总之看起来都跃跃欲试。那这是不是一个值得开拓的方向呢？接下来就以问答的形式来探讨一下目前流式荧光试剂的一些开发和应用问题。
A 流式荧光相对于化学发光有什么优势吗？
流式荧光最核心的卖点就是单孔多联检。同样都是10-50uL的血清，化学发光只可以出单项结果，流式荧光可以出几十项结果。从所出结果的准确度方面考虑，流式荧光与化学发光几乎没有什么差别，而且理论上如果磁珠清洗液对于PE的保存十分有利，流式荧光的稳定性甚至是优于酶促发光的，也就是长时间的放置也不会影响最终的读数。
B 单孔多联检的实现会给流式荧光省去很多的反应时间吗？ 因为流式荧光和化学发光的反应过程几乎是一致的，谈到节省时间，应该不会有太大的优势。我举个例子，比如我们做的项目是抗核抗体16项，假如发光和流式荧光的反应过程耗时一样，最终读数的时候，发光是每隔10s读取一个结果，单样本需要耗时160s；流式是1min读取16个结果，也就是60s；看起来每个样本流式会节省100s，但是这通常构不成绝对的优势，况且发光试剂的反应时长通常都是短于流式的。比如再举个例子，细胞因子12项，我知道像是IL-6这种，罗氏的第一个样本报告时间最快可以是20多分钟，而大多数流式的反应时间就已经达到了1-2个小时，所以从结果的报告时长来看，流式却又并不占优势了。与其说是流式节省时间，倒不如说流式节省的是样本和试剂仓的孔位，让整个反应节省了仪器很多的空间，流程也更加简化。
C 流式试剂相比于发光试剂，会节省成本吗？
这个答案是肯定的。首先就是耗材的成本，单孔位可以完成多孔位的工作，反应杯和工作液都可以省出很多。尤其是抗原抗体的应用量，我举个例子。比如对于发光，1mg磁珠按照50ug的蛋白标记量，最终做成10mL的工作液，如果按照50uL每人份的话，那么50ug蛋白可以做成200人份；对于流式，50ug蛋白可以标记10^7个磁珠，而这些磁珠可以做20000人份试剂！200vs20000，你可以体会到1mg蛋白用到天荒地老的乐趣了。
D 传统的发光厂家可以直接跨越到流式荧光吗？ 没问题。对于全自动流式荧光免疫分析仪，和磁微粒发光仪器相比，可以说除了检测模块，没有任何的区别。只要把最常用的2激光8通道的检测模块安装到自己原有的发光仪器里面，就可以完全适用。而且，如果你是做发光比较成熟的企业，还可以做成流式和发光全自动一体机，这也是目前全自动仪器的进一步拓展，原有发光产品的应用不受限制。比如目前东方生物的产品Mplex-MA1600就是如此。但是，这样一来仪器成本会相应增加，这也是企业需要考虑的因素。对于试剂研发而言，发光和流式也不会有什么差别，几乎可以做到无缝衔接，唯一的区别就是磁珠。
E 编码磁珠的成本高吗？可不可以自己制备？有技术壁垒吗？
目前做编码磁珠的厂家是越来越多了，要相信上游原料厂家的嗅觉是非常灵敏的。像是为度、碧芯、纳微、新纵科等等都在忙着新微球的制备。从各个厂家的研发进度来看，编码磁珠的研发并不是一件难事，因此企业花点成本去搞微球的研发也是值得的，因为采购别人的微球目前来看成本还是略高的。
F 企业引进流式，哪些项目是必须要做的？真的有这个必要吗？
流式平台的引入，很有必要做的项目有细胞因子、自身免疫项目、过敏原检测项目、肿瘤筛选、传染病联检项目、心肌联检项目、肝纤项目等…其实完全可参考透景这个老大哥的企业动态，毕竟他们家引入流式平台是国内很早的。但是反过来我们看一下透景的流式平台的发展，好像并不是特别尽如人意。
像是细胞因子检测，临床意义都没有特别明确；自身免疫检测，欧蒙的客户教育无人能敌；过敏原检测，帝迈目前拿证一段时间了却还没有发力；传染病项目，Elisa的地位基本上很难撼动；心肌联合检测，肝纤四项，发光甚至荧光POCT都够用了…
另外就是几十项联合检测的医院收费问题也是关键，如果项目太少，发光就够用；项目太多，又涉嫌捆绑销售。所以整体来看，流式企业如何规划自己的产品组合以迎合市场需求，可能会让市场部的人费点心思。
G 目前拿证的全自动流式荧光分析仪多吗？竞争力怎么样？
以下是药监局目前拿证的几家全自动流式荧光发光免疫分析仪，目前来看做的企业并不是很多，如果定位要做，现在起步还并不晚。本人大致浏览了一下各个厂家的仪器，算是中规中矩吧，令人惊艳的目前还没有，所以肯定还需要后来革命者。
最后总结一下：
1.相较于发光而言，目前流式荧光除了原材料方面比较节省，在仪器成本、检测时间方面还没显现出非常凸出的优势；
2.目前的流式全自动仪器并无技惊四座的地方，从化学发光到流式也基本上没有技术壁垒，唯一有技术含量的就是编码磁珠的开发，但随着磁珠制备厂商的遍地开花，自己开发似乎也没那么必要；
3.为了迎合流式平台的特点，像是细胞因子，自身免疫等很多公司之前没有涉及的项目就得重新立项和注册，但是这些产品真正做的意义有多大，做出来市场竞争力如何，好像无从考量，只是单纯地为了建设这个平台而新增的工作；
4.想比于免疫印迹，基于编码磁珠的流式荧光平台确实给了多联检定量更多的可能性，但是这些项目的样本含量和交叉反应性却都限制了流式平台的组合应用，比如CRP和SAA可以联检，CRP(0.5-200ug/ml)和PCT(0.1-100ng/ml)联检就显得有些困难，线性区间差别太大。
5.目前流式平台各个厂家都属于刚起步阶段，如果企业规划里目标很明确就是要搞自免项目，那么目前搞一搞这个平台相对来说还是比较有竞争力的，毕竟市场还未被挖掘的太厉害。但布局肯定是越快越好，比如帝迈的过敏原检测，目前基于流式平台有证的仅此一家，虽然捡了湖南省药监局免临床的一波福利，但是人家捡的恰到好处也是一种能力。目前虽然帝迈还没有发力，只能说他们比较低调，还在认真打磨这个产品。一旦开始发力，抓住市场，后来者将非常被动。因为临床费用就卡住了很多人的脖子，更别说后续的市场开拓了。
总而言之，要么就别做，做就要稳准狠，只要落下一步，就会被市场抛弃。
2023-8-25 |
